Identification d'une interaction protéique spécifique à une séquence conservée dans la région 3' non-traduite de l'ARN messager de prostaglandine endoperoxide H synthase-1.

Abstract

L'enzyme prostaglandine endoperoxide H synthase-1 (PGHS-1) est très abondante dans les plaquettes où elle catalyse l'étape limitante dans la formation du thromboxane A 2 (TxA 2 ), une substance agrégatoire et vasoconstrictive. Cependant, dans les cellules desquelles dérivent les plaquettes, les mégacaryocytes, l'enzyme est quasi absente bien que son ARN messager (ARNm) soit présent. En effet, lorsque les cellules MEG-01 sont récoltées après 1 et 4 jours d'exposition au TPA pour stimuler leur différenciation en plaquettes, les niveaux d'ARNm de PGHS-1 sont élevés dans les deux extraits, tandis que l'enzyme n'est détectée qu'après 4 jours. Nous avons émis l'hypothèse qu'une interaction ARN-protéines) dans la région 3 ' non-traduite (R3 ' NT) de l'ARNm PGHS-1 , pourrait expliquer le délai observé entre les accumulations d'ARNm et de protéine PGHS-1. Les séquences de la R3 ' NT de l'ARNm PGHS-1 de quatre espèces mammifères ont été comparées, ce qui a permis l'identification d'un segment de 20 nucléotides (nts) parfaitement conservé. Cette séquence a été utilisée comme sonde d'ARN dans des études de retardement sur gels. (Abstract shortened by UMI.)